　　光路中需加上一个双色束分离器，它与光铀呈45度，激发光被反射到物镜中，并聚集在样品上，样品所产生的荧光以及由物镜透镜表面、盖玻片表面反射的激发光同时进入物镜，反回到双色束分离器，使激发光和荧光分开，残余激发光再被阻断滤片吸收。如换用不同的激发滤片、双色束分离器、阻断滤片的组合插块，可满足不同荧光反应产物的需要。

　　为了能用计算机存贮、处理和分析图像，需将图像数字化。一帧图像是由不同灰度的一种分布所组成，用数学符号表示为j=j（x,y），x、y为图像上像素点的坐标，j则表示其灰度值。那么如何操作工业电子显微镜呢？

　　1、将本设备置于一个对操作员舒适的工作台平台，然后打开反射光（表面光），在显微镜底座上放上一个式样，比如硬币，将变倍旋钮旋到至低倍数,通过调节升降组找到大致焦平面。

　　2、调整目镜的观察瞳距，并调整目镜上的屈光度以找到焦平面。

　　3、利用以上方法，逐渐旋大变倍旋钮的倍数，适当调节显微镜的升降组，逐渐找到至大倍数的焦平面。调节过程中，请利用硬币上比较明显的参照点比对成像的清晰度。

　　4、将变倍旋钮旋到至低倍数，也许像会有一些失焦，此时请不要再调节升降组进行对焦，只需调节两只目镜上面的屈光度已适应眼睛的观察（屈光度因人而异）。此时，显微镜已经齐焦，即显微镜从高倍变倍到低倍，整个像都在焦距上。同样的试样，我们不需要再调节显微镜的其他部件，只需要旋动变倍旋钮就可以轻松对试样进行变倍观察了。

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